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如何正確的選擇熒光定量PCR儀

更新時(shí)間:2022-10-12瀏覽:938次

  定量PCR儀主要由兩部分組成,一個(gè)是PCR系統(tǒng),一個(gè)是熒光檢測(cè)系統(tǒng)。選擇定量PCR儀的關(guān)鍵——由于定量PCR必需借助樣本和標(biāo)準(zhǔn)品之間的對(duì)比來實(shí)現(xiàn)定量的,對(duì)于定量PCR系統(tǒng)來說,重要的參數(shù)除了傳統(tǒng)PCR的溫控精確性、升降溫速度等等,更重要的還在于樣品孔之間的均一性,以避免微小的差別被指數(shù)級(jí)放大。
至于熒光檢測(cè)系統(tǒng),多色多通道檢測(cè)是當(dāng)今的主流趨勢(shì)——儀器的激發(fā)通道越多,儀器適用的熒光素種類越多,儀器適用范圍就越寬;多通道指可同時(shí)檢測(cè)一個(gè)樣品中的多種熒光,儀器就可以同時(shí)檢測(cè)單管內(nèi)多模版或者內(nèi)標(biāo)樣品,通道越多,儀器適用范圍越寬、性能就更強(qiáng)大。熒光檢測(cè)系統(tǒng)主要包括激發(fā)光源和檢測(cè)器。激發(fā)光源有鹵鎢燈光源、氬離子激光器、發(fā)光二極管LED光源,前者可配多色濾光鏡實(shí)現(xiàn)不同激發(fā)波長,而單色發(fā)光二極管LED價(jià)格低、能耗少、壽命長,不過因?yàn)槭菃紊?,需要不同的LED才能更好地實(shí)現(xiàn)不同激發(fā)波長。監(jiān)測(cè)系統(tǒng)有超低溫CCD成像系統(tǒng)和PMT光電倍增管,前者可以一次對(duì)多點(diǎn)成像,后者靈敏度高但一次只能掃描一個(gè)樣品,需要通過逐個(gè)掃描實(shí)現(xiàn)多樣品檢測(cè),對(duì)于大量樣品來說需要較長的時(shí)間。
定量PCR儀需要考慮的另外一個(gè)因素是軟件設(shè)計(jì),這一點(diǎn)目前較新型號(hào)的儀器都有不錯(cuò)的配套軟件可以滿足常規(guī)使用。

 

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