凝膠成像系統(tǒng),顧名思義以一套可對凝膠進行成像的光學(xué)系統(tǒng),而光源便是其光路系統(tǒng)的重要組成部分,可以說沒了光源,成像系統(tǒng)幾乎無法運行使用,但與CCD、鏡頭以及分析軟件相比,往往卻沒有得到應(yīng)有的重視。
凝膠成像系統(tǒng)的各種光源及其用途做簡要介紹:
首先是雙側(cè)反射白光光源,也是我們使用zui多的光源,通常作為系統(tǒng)照明光源使用,即放置或調(diào)整DNA膠或蛋白膠位置,或在對鏡頭調(diào)整聚焦時使用,當然在對非透明材質(zhì)的蛋白膠或其他成像物質(zhì)進行成像時也需開啟反射白光。
其次透射白光,即通常所說白光板,主要用于蛋白質(zhì)膠拍攝時使用,因為白光板位于透射紫外燈箱上方,所以為不影響透射紫外光源的使用,同時也更節(jié)約室內(nèi)空間,白光板一般可以折疊豎立在箱體后部。
透射紫外光源,即紫外透射燈箱,主要用于DNA膠拍攝,由于DNA常用的熒光染料是EB(即Ethidium bromide,溴化乙錠),而用標準302nm 紫外光透射儀激發(fā)并放射出橙紅色信號,可用帶CCD成像頭的凝膠成像系統(tǒng)拍攝到,所以透射紫外的波長通常是305nm段。
紫外反射燈源,一般為選配件,主要原因是其使用并不廣泛,只是在非透明材質(zhì)的DNA跑膠載體如紙層析等的成像才需要使用。往往比較常用的還是透明的瓊脂糖凝膠與聚丙烯酰胺凝膠,透射光源*可以滿足,所以大部分廠家都只將紫外反射光源作為選配,只是在儀器上預(yù)留了位置與接口。